注意事項：

1 該 ELISA 程序適用于針對純化抗原（蛋白質或肽）產生的抗體的定性檢測。這并不是為了測量血清或其他液體中的抗體濃度而設計的。

2 該程序假設一抗是在兔子中產生的。如果使用其他宿主動物，則需要使用適當的第二抗體。  

涂層：

1. 配制 1-10 ug/ml 溶液。包被緩沖液中的抗原（肽或蛋白質）（不儲存稀釋的抗原）。

2. 分配 100 ul 抗原溶液，包被高結合 ELISA 條板（目錄號 80112）。每口井。用粘合膜覆蓋板。在室溫下孵育 2-6 小時或在 4°C 下孵育過夜，同時輕輕搖動軌道。

3. 吸出溶液并用洗滌緩沖液洗滌板 2 次。

封閉：

1. 通過從儲備液中稀釋來制備封閉緩沖液。每孔分配 300 ul，將板在室溫下孵育 2-6 小時或在 4°C 下輕輕混合過夜。

2 吸出封閉緩沖液。并輕拍紙巾以除去所有溶液。該板可直接用于測定或在密封袋中保存在 4oC 下以備將來使用。

抗體測定：

1. 用抗體/結合物稀釋液稀釋免疫前血清和免疫血清（連續稀釋 1:100、1:1K、1:10K、1:100K）。將 100 ul 每種抗體和免疫前稀釋液分配到抗原包被的孔中。

2. 用粘合膜覆蓋板。在室溫下孵育 30 分鐘，并輕輕搖動軌道。

3. 吸出溶液并用洗滌緩沖液洗滌板 5 次（每次洗滌應使用 200-300 ul 洗滌緩沖液；洗滌不當會導致高背景）。

4. 用抗體綴合物稀釋劑稀釋抗兔 IgG-HRP 綴合物 (1:5K-1:20K)。每孔分配 100 ul 結合物（結合物稀釋不當可能導致顏色過低或背景過高）。

5. 用粘合膜覆蓋板。在室溫下孵育 30 分鐘，并輕輕搖動軌道。

6. 吸出板并用洗滌緩沖液洗滌板 5 次。輕拍紙巾以除去所有溶液。

7. 每孔分配 100 ul 的即用型 TMB 底物溶液。

8. 用粘合膜覆蓋板。在室溫下孵育長達 15 分鐘，并輕輕搖動軌道。陽性孔中會出現藍色。

9 分配 100 ul 稀釋溶液。每口井。藍色將變成黃色。

10. 讀取 450 nm 處的吸光度。  

注意：所有試劑必須使用新的吸頭和試劑儲液器進行分配。 ELISA 所需的所有試劑（除特定抗原或抗體外）都可以方便地以試劑盒形式購買。  

目錄# 產品描述

80150 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的小鼠抗體，75 分鐘

80155 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的大鼠抗體，75 分鐘

80160 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的兔抗體，75 分鐘

80165 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的山羊抗體，75 分鐘

80166 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的綿羊抗體，75 分鐘

80170 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的人抗體，75 分鐘

80171 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的 G. Pig 抗體，75 分鐘

80175 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的猴抗體，75 分鐘

80176 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的雞抗體，75 分鐘

80180 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的倉鼠抗體，75 分鐘

80185 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的牛抗體，75 分鐘

80186 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的豬抗體，75 分鐘

80187 ELISA 試劑盒，用于檢測血清中的火雞抗體，75 分鐘

該試劑盒包含所有試劑，包括包被緩沖液、洗滌緩沖液、抗體/綴合物稀釋劑。 TMB 底物、終止液、抗兔 IgG-HRP 綴合物；提供足夠的試劑進行 1000-2000 次測試或 10-20 ELISA 板）。請根據一抗宿主獲取試劑盒。上述試劑盒可用于測定針對給定抗原的抗體滴度。它們不適合測定血清中的抗體（IgG、IgA 或 IgM）濃度。